Técnicas de Edición de Acidos Nucléicos - Ratón biparental obtenido con CRISPR

Descendencia bipaternal adulta generada mediante modificación directa de genes impresos en mamíferos

Tipo de edición: 

En el estudio la modificación genética se realiza ex vivo en células madre embrionarias haploides androgénicas, que se modifican en laboratorio y luego se inyectan en oocitos mediante ICSI. Los embriones modificados se transfieren in vivo al útero de madres de sustitución para su desarrollo. Las modificaciones genéticas se aplican a células somáticas como los fibroblastos

Dirigido hacia:

Genes improntados: Igf2-H19, Dlk1-Dio3, y Rasgrf1

Dirigido por:

• Técnica CRISPR/Cas9 y nucleasas de dedos de zinc (ZFN) para la modificación genética
• Vector adenoviral (Ad5-Cas9) y vector rAAV también fueron utilizados

Órgano a tratar:

Riñones y pulmones

• Células diana: Células madre embrionarias haploides androgénicas (ahESC) y fibroblastos somáticos

Vía de administración:

Parenteral (inyección intracitoplasmática de esperma (ICSI) y transferencia de embriones al útero de madres de sustitución)

Resultados a corto plazo:

A los 7 días después de la inyección, se observan diferencias en el desarrollo de los embriones bipaternos, pero con una tasa de mortalidad temprana debido a deficiencias en la succión y problemas respiratorios

Resultados a mediano plazo:

Después de 80 días, se observó una mejoría en el desarrollo de los ratones bipaternos con 18 y 20 modificaciones de impronta, mejorando su viabilidad, pero aún con limitaciones, como deficiencias en la capacidad de succión

Resultados a largo plazo:

Los ratones bipaternos con 20 modificaciones de impronta mostraron una supervivencia más alta, pero la tasa de mortalidad persistió debido a defectos en la impronta genética que afectaron su desarrollo completo y reproducción natural

Imagen: Clonación de crías bipaternas a partir de células somáticas de ratones bipaternos. (A) Comparación transcriptómica de células somáticas derivadas del cerebro de ratones bipaternos de 6 semanas de edad y ratones WT de la misma edad. (B) Esquema que muestra el proceso de obtención de fibroblastos de la punta de la cola de ratones bipaternos para la clonación de células somáticas. (C) Clon de un ratón bipaterno 20KO y su placenta. (D) Embriones bipaternos reconstruidos con esperma de ratones 20KO desarrollados hasta la etapa más avanzada.

Obtenido de: https://www.cell.com/cell-stem-cell/fulltext/S1934-5909(25)00005-0#

Referencia

1. Li Z, Wang L, Wang L, Sun X, Ren Z, Ma S, et al. Adult bi-paternal offspring generated through direct modification of imprinted genes in mammals. Cell Stem Cell. 2025 Jan. Disponible en: https://www.cell.com/cell-stem-cell/fulltext/S1934-5909(25)00005-0#